Immunassay Vérvizsgálat A Parazitológiában

Tartalomjegyzék:

Immunassay Vérvizsgálat A Parazitológiában
Immunassay Vérvizsgálat A Parazitológiában
Anonim

Az enzimhez kapcsolt immunszorbens vizsgálatot akkor végezzük el, ha nehézségek merülnek fel a diagnózissal, ha a betegnek örökletes hajlama van bizonyos betegségekre, a kezelés hatékonyságának értékelése céljából. Az ELISA egy modern laboratóriumi teszt, amely elősegíti a vérben lévő bizonyos antitestek azonosítását bizonyos betegségek esetén. A módszer nagyon specifikus és érzékeny.

A cikk tartalma:

  • 1 Immunassay
  • 2 Az enzim immunoassay módszer alapelvei és alapelvei
  • 3 IgG, IgM, IgA antitest különböző osztálya

    • 3.1 IgM antitestek
    • 3.2 IgG antitestek
    • 3.3 IgA antitestek
  • 4 A módszer előnyei
  • 5 A módszer hátrányai
  • 6 Kinevezés indikációi és kimutatható betegségek
  • 7 A vizsgált biológiai anyag és gyűjteményének jellemzői
  • 8 Az ELISA eredmények készségének ütemezése
  • 9 Enzim immunoassay értelmezése
  • 10 lehetséges ELISA eredmény
  • 11 Összefoglalva

Kapcsolt immunszorbens vizsgálat

Mi az ELISA elemzés?
Mi az ELISA elemzés?

Az elemzés feltárja az egyes kórokozókra jellemző antigéneket és az ellenanyagokat. Az enzimhez kapcsolt immunszorbens vizsgálat azon alapul, hogy egy antigén és egy specifikus antitest kölcsönhatása reakcióba lép, amelynek eredményeként létrejön egy komplex, amelynek összetételében külön címke van, amely a reagens hatására megváltoztatja a minta színét.

A festés intenzitása alapján meg lehet ítélni az adott fertőzésre jellemző antitestek vagy antigének jelenlétét, és már a felszerelés segítségével meghatározzuk ezek mennyiségét. Az antigének idegen anyagok, amelyek immunvédelmi reakciót okoznak a testben - specifikus fehérjék (immunoglobulinok) képződnek.

Minden kórokozónak megvan a saját antigénkészlete, és az immunválasz ezekre is specifikus. Az elemzés fő anyaga a vénából származó vér.

Az enzimekhez kapcsolt immunszorbens vizsgálat lehetővé teszi a nagy pontosságú latens betegségek azonosítását a korai szakaszban, az orvos tájékoztatását a páciens általános állapotáról és a kóros betegségek kialakulásának kockázatáról, a reproduktív egészség állapotáról.

Elemzést végeznek a vírusos betegségek: herpesz, hepatitis, citomegalovírus, Epstein-Barr vírus stb., Nemi úton terjedő fertőzések: gonorrhea, ureaplasma, chlamydosis, mycoplasma, Trichomonas, szifilisz diagnosztizálása céljából, a hormonális szint meghatározására, a rák és a immunhiány, az allergia kimutatása és kezelése. Az elemzéshez a vér mellett cerebrospinális folyadékot, amniotikus folyadékot és az üveges test tartalmát is vehetik.

Az elemzés az ELI tesztek egy csoportjának használatát feltételezi:

  • ELI-B teszt, amely lehetővé teszi következtetések levonását az immunrendszer állapotáról;
  • ELI-Dia-teszt, amely meghatározza az endokrin rendszer állapotát. Segítségével diagnosztizálják az első és a második típusú cukorbetegséget;
  • ELI-N-Complex-12, amely a perifériás és a központi idegrendszer állapotáról tájékoztat;
  • ELI-Ankor-test-12, elemzés, amely felméri a szív és az erek állapotát, felméri a stroke, szívroham kialakulásának kockázatát;
  • Az ELI-Viscero-16 a beteg általános állapotának felmérésére készül. Ez a teszt 16 indikátor diagnosztikáját biztosítja: belek, idegrendszer, szívizom, vesék, immunrendszer, máj, gyomor stb.;
  • Az ELI-P-komplex-12 célja a test reproduktív képességének felmérése;
  • ELI-GIT-12 - elemzés, amely felméri a gyomor-bél traktus állapotát, és lehetővé teszi a patológiák kialakulásának kockázatát;
  • Az ELI-HCG-APS teszt a reproduktív egészségügyi rendellenességeket fedezi fel.

Az enzim immunoassay módszer alapelvei és alapelvei

Az enzimhez kapcsolt immunszorbens vizsgálat (ELISA) az antigén-antitest reakción alapuló laboratóriumi diagnosztikai módszer, amely lehetővé teszi a fehérjeanyagok (ideértve az enzimeket, vírusokat, baktériumfragmenseket és a biológiai folyadékok más alkotóelemeit) azonosítását. Az enzim immunoassay működésének megértése érdekében próbáljuk megérteni az "antigén-antitest" reakció lényegét. Az antigén a testre idegen molekula, általában fehérje eredetű, amely egy fertőző ágenssel együtt bejuthat az emberi testbe.

Valaki más vérrészei (ha ez nem egyezik a csoportunkkal) szintén antigének. A szervezetben az antigének képesek immunválaszt kiváltani, amelynek célja a belső környezet integritásának megóvása az idegen anyagoktól. Ezért testünk speciális anyagokat - antitesteket (immunoglobulinokat) szintetizál, amelyek képesek az antigénekkel a "zárolás kulcs" elv szerint kapcsolódni és immunkomplexekbe köti őket (ezt a folyamatot "antigén-antitest" reakciónak nevezik).

Kapcsolt immunszorbens vizsgálat. Az ilyen immunkomplexeket az immunsejtek könnyebben felismerik és megsemmisítik. Többféle antitest létezik, amelyek mindegyike az immunválasz egy meghatározott szakaszában lép működésbe. Így először az M osztályú immunoglobulinokat (IgM) szintetizálják az antigén testbe történő bejutásának válaszában.

Ezen antitestek mennyisége a fertőző folyamat kezdeti napjaiban a legmagasabb. Ezek után az immunrendszer a vérbe enged G osztályú immunglobulineket (IgG), amelyek elősegítik az antigének megsemmisítését, amíg a fertőzés teljesen le nem szűnik, és a jövőben is tovább folyik az erekön keresztül, és immunitást biztosít az újrafertőzéshez.

A vakcinázás ezen a jelenségen alapszik: a meggyengült mikrobák és vírusok antigénjeit tartalmazó oltásoknak köszönhetően nagy mennyiségű IgG jelenik meg a vérünkben, amely valódi fenyegetéssel való érintkezés esetén gyorsan elnyomja a fertőzést - még mielőtt károsítja az egészséget. Vannak még A osztályú immunglobulinok (ezeket nagy mennyiségben találják meg a nyálkahártyákban, védik a test „megközelítését”), E (az élősködők elleni küzdelem) és mások.

Mi az ELISA elemzés?
Mi az ELISA elemzés?

A laboratóriumi diagnosztika során az érdeklődésre számot tartó objektumok leggyakrabban az IgM, IgG és IgA: koncentrációjuk alapján ki lehet értékelni, hogy melyik szakaszban van a fertőző folyamat, és azt is megtudhatja, hogy valaha volt-e valamely személynek valamilyen speciális betegsége (például rubeola vagy bárányhimlő). Honnan tudja, hogy mely antigének vagy antitestek vannak jelen az emberi testben? Ha az orvos azt gyanítja, hogy egy bizonyos fertőzés a betegség oka, vagy meg akarja mérni egy bizonyos hormon koncentrációját, előír egy enzim immunoassay-t a beteg számára.

Az "antigén-antitest" reakció reprodukálható laboratóriumi körülmények között: kész antitesteket vagy antigéneket használjon annak meghatározására, hogy a megfelelő vegyület van-e a vizsgált mintában. Először be kell szereznie a biológiai folyadék mintáját - általában vérszérumot. A laboratórium olyan üregekkel ellátott műanyag lemezeket használ, amelyek már tartalmazzák a feltételezett kórokozó tisztított antigénjeit (vagy antitesteket, ha az a feladat, hogy antigént keressenek).

A mintákat olyan üregekbe helyezzük, ahol immunkomplexek alakulnak ki vagy sem. Ha a "találkozóra" sor került, egy speciális festék enzimatikus reakcióba lép az egyesített molekulával, amely lehetővé teszi az elemzés eredményének következtetését instrumentális optikai sűrűségértékeléssel.

Az ELISA kvalitatív és mennyiségi. Az első esetben egyértelmű válasz merül fel: a kívánt anyag vagy megtalálható, vagy nem található meg a mintában.

A kvantitatív elemzés esetében a bonyolultabb reakciólánc lehetővé teszi az antitestek koncentrációjának felmérését az ember vérében, amely a korábbi tesztek eredményeivel összehasonlítva megválaszolja a fertőző folyamat fejlődésének kérdését. Érdekes módon az enzim immunoassay előfutára radioimmunoassay volt, amely jelölt antitesteket és antigéneket használt a sikeres reakció azonosításához. Mivel az ilyen diagnosztika elvégzése potenciális veszélyt jelentett a laboratóriumi személyzet egészségére, a tudósok biztonságos alternatívát kerestek a minták „megfestésére”. Tehát 1971-ben találták ki az IFA-t.

IgG, IgM, IgA antitestek különféle osztályai

Mi az ELISA elemzés?
Mi az ELISA elemzés?

Az enzimhez kapcsolt immunszorbens módszer kimutatja az Ig különböző osztályaiba tartozó fertőzések antitesteit (G, A, M). A vírus elleni antitesteket a fertőzés jelenlétében már nagyon korai szakaszban meghatározzák, ami biztosítja a betegség lefolyásának hatékony diagnosztizálását és ellenőrzését. A fertőzések diagnosztizálásának leggyakoribb módszerei az IgM antitestek (a fertőzés akut fázisa) és az IgG antitestek (a fertőzésnek ellenálló) tesztei. Ezeket az ellenanyagokat a legtöbb fertőzésnél meghatározzák.

Az egyik leggyakoribb teszt - a kórházi szűrés (HIV, szifilisz, valamint B és C hepatitisz) - nem különbözteti meg az antitestek típusát, mivel ezeknek a fertőzéseknek a vírusaival szembeni ellenanyagok jelenléte automatikusan a betegség krónikus lefolyására utal, és például ellenjavallatként szolgál súlyos műtéti beavatkozásokhoz. Ezért fontos a diagnózis megcáfolása vagy megerősítése.

Kapcsolt immunszorbens vizsgálat. Az antitestek típusának és mennyiségének részletes diagnosztizálása diagnosztizált betegségben az egyes fertőzések és antitestek típusainak elemzésével elvégezhető. Az elsődleges fertőzést akkor észleljük, amikor a vérmintában diagnosztikailag jelentős IgM antitestek szintet észlelnek, vagy az IgA vagy IgG antitestek számában jelentős növekedést mutatnak páros szérumokban, 1-4 hetes intervallummal.

Az újrafertőződést vagy az újrafertőződést az IgA vagy IgG antitest szintjének gyors emelkedése detektálja. Az IgA antitestek magasabb az idősebb betegekben és pontosabban diagnosztizálják a jelenlegi fertőzést felnőtteknél.

A múltbeli vérfertőzést úgy határozzuk meg, hogy megnövekedett IgG-ellenanyagokként növekszik a koncentrációjuk, páros mintákban, kéthetes intervallumban. Ugyanakkor nincs IgM és A osztályú antitest.

IgM antitestek

Mi az ELISA elemzés?
Mi az ELISA elemzés?

Koncentrációjuk hamarosan növekszik a betegség után. Az IgM antitesteket már 5 nappal a megjelenése után detektálják, és egy-négy hétig elérték a csúcsot, majd néhány hónapon belül diagnosztikai szempontból jelentéktelen szintre csökkennek, még kezelés nélkül is. A teljes diagnózishoz azonban nem elegendő csak az M osztályú antitestek meghatározása: ezen antitest osztály hiánya nem jelenti a betegség hiányát. A betegségnek nincs akut formája, de krónikus is lehet.

Az IgM antitestek nagy jelentőséggel bírnak a hepatitis A és a gyermekkori fertőzések (rubeola, szamárköhögés, bárányhimlő) diagnosztizálásában, melyeket levegőben lebegő cseppek könnyen átvihetnek, mivel fontos a betegséget a lehető leghamarabb azonosítani és a beteg személyét elkülöníteni.

IgG antitestek

Az IgG antitestek fő szerepe a test hosszú távú védelme a legtöbb baktérium és vírus ellen - bár ezek előállítása lassabban zajlik, az antigén stimulusra adott válasz továbbra is stabilabb, mint az IgM osztályú antitestek.

Kapcsolt immunszorbens vizsgálat. Az IgG antitestek szintje lassabban (15-20 nappal a betegség kezdete után) emelkedik, mint az IgM, de hosszabb ideig továbbra is emelkedett, és ezért hosszú távú fertőzést mutathat IgM ellenanyagok hiányában. Az IgG-szint évek óta alacsony lehet, de ugyanazon antigén ismételt kitettsége esetén az IgG-ellenanyagszint gyorsan emelkedik.

A teljes diagnosztikai kép érdekében meg kell határozni az IgA és IgG antitesteket egyidejűleg. Ha az IgA eredménye nem egyértelmű, igazoljuk IgM meghatározással. Pozitív eredmény és pontos diagnózis esetén az első után 8–14 nappal elvégzett második tesztet párhuzamosan kell ellenőrizni az IgG koncentráció növekedésének meghatározása céljából. Az elemzés eredményeit a többi diagnosztikai eljárás során nyert információkkal összefüggésben kell értelmezni.

Az IgG antitesteket elsősorban a Helicobacter pylori diagnosztizálására használják, amely a fekélyek és a gastritis egyik oka.

IgA antitestek

A szérumban jelennek meg a betegség kezdete után 10–14 nappal, és először még mag- és hüvelyvízben is megtalálhatók. Az IgA antitest szintje általában 2–4 hónappal csökken a fertőzés után, ha a kezelés sikeres. Újrafertőzéskor az IgA antitest szintje ismét emelkedik. Ha az IgA szint nem csökken a kezelés után, akkor ez a krónikus fertőzés jele.

A módszer előnyei

Az ELISA vitathatatlan előnyei a módszer nagy érzékenysége és specifitása. Az érzékenység az a képesség, hogy felismerje a célanyagot, akkor is, ha annak koncentrációja a mintában alacsony. A specifitás viszont a diagnózis pontosságát vonja maga után: ha az eredmény pozitív, ez azt jelenti, hogy pontosan azt a antitestet vagy antigént találták, amelyre feltételezték, és nem másoknak.

Az enzimhez kapcsolt immunszorbens vizsgálat nagyrészt felváltotta a mikrobiológia „aranystandardját” - egy bakteriológiai diagnosztikai módszert, amelynek során a kórokozó azonosítása érdekében elválasztották a testből, majd a tenyészetet tápközegben tenyésztőcsőben több napig tenyésztették. Az elemzés folyamán az orvosok egész ideje kénytelenek voltak vakon kezelni a beteget, és a mikroorganizmus eredetére sejtették a betegség tüneteitől.

Az IgM ELISA-val történő meghatározása lehetővé teszi a pontos diagnosztizálást a betegség első napjaiban. Az enzim immunoassay nagyfokú gyárthatósága minimalizálja az emberi faktor befolyását, ami csökkenti a hiba valószínűségét. A modern laboratóriumokban használt ELISA tesztkészletek és reagensek többségét ipari környezetben gyártják, ami garantálja a pontos eredményt.

A módszer hátrányai

Mi az ELISA elemzés?
Mi az ELISA elemzés?

Sajnos az ELISA elvégzéséhez tudnia kell, hogy mit kell keresnie: az elemzési módszer azt jelenti, hogy az orvosnak előre becslése van a betegség természetéről. Ezért nincs értelme előírni egy ilyen tesztet abban a reményben, hogy véletlenül "kitalálhatja" a diagnózist. A fertőző betegségek diagnosztizálása esetén az enzim immunológiai vizsgálata nem képes megtalálni a kórokozót és meghatározni annak specifikus tulajdonságait: ez csak antitestek jelenlétét jelzi a páciens vérében, közvetetten jelzi az idegen mikroorganizmusok jelenlétét az emberi testben.

Az ELISA rendkívül pontos, de nem olcsó módszer, ezért okosan kell használnia, és az eredményeket képzett orvosnak kell értelmeznie.

Kinevezés indikációi és kimutatott betegségek

Lehetetlen lefedni az ELISA indikációinak teljes listáját. Az elemzés leggyakoribb céljai: Akut és krónikus fertőző betegségek diagnosztizálása:

  • IgM és IgG a vírusos hepatitis A, B, C, E, valamint a hepatitis B és C antigénekhez;
  • IgG-től HIV-ig; Ig M és IgG a citomegalovírus fertőzéshez;
  • IgM és IgG az Epstein-Barr vírushoz; Ig M és IgG herpeszfertőzésekhez;
  • Ig M és IgG toxoplasmosis;
  • Ig M és IgG a kanyaró, a rubeola, a szalmonellózis, a dizentéria, a kullancsos encephalitis és más betegségek esetében;
  • IgG parazita betegségekhez;
  • Ig M és IgG szexuális úton terjedő fertőzésekhez;
  • IgG Helicobacter pylori fertőzéshez.

Az emberi immunitás indikátorainak és egyes autoimmun betegségek markereinek általános értékelése. Onkológiai markerek (tumor nekrózis faktor, prosztataspecifikus antigén, rák-embrionális antigén és mások) azonosítása. Hormontartalom meghatározása a vérszérumban (progeszteron, prolaktin, tesztoszteron, pajzsmirigy stimuláló hormon és mások).

A vizsgált biológiai anyag és gyűjteményének jellemzői

Mi az ELISA elemzés?
Mi az ELISA elemzés?

Az ELISA fő biológiai anyaga a vérszérum: a laboratóriumban vénát vesznek a betegből egy vénából, ahonnan az elemzést bonyolító alakú elemek eltávolíthatók. Más esetekben cerebrospinális folyadékot, amniotikus folyadékot, nyálkahártyák kenetét stb. Használják az elemzéshez.

Az eredmények torzulásának elkerülése érdekében ajánlott vért adni éhgyomorra, és két héttel a vizsgálat előtt (ha a cél krónikus, látens fertőző betegségek diagnosztizálása) meg kell szüntetni az antibiotikumok és antivirális gyógyszerek szedését. Az ELISA eredmények készenléti feltételei Ha rendelkeznek a szükséges reagensekkel és a laboratórium megfelelő szervezésével, a teszt eredményét a vérvétel után 1–2 napon belül megkapják. Egyes esetekben, ha sürgősségi reagálásra van szükség, ez az időtartam 2-3 órára csökkenthető.

Az IFA eredmények készen állnak

Ha rendelkeznek a szükséges reagensekkel és a laboratórium megfelelő szervezésével, a teszt eredményét a vérvétel után 1–2 napon belül megkapják. Egyes esetekben, ha sürgősségi reagálásra van szükség, ez az időtartam 2-3 órára csökkenthető.

Az enzim immunoassay dekódolása

A jó minőségű ELISA eredménye egyértelmű ítélet lesz: a kívánt anyag vagy megtalálható, vagy nem található meg a mintában. Ha kvantitatív elemzésről beszélünk, akkor a koncentráció numerikus értékben vagy bizonyos számú "+" jel (egyről többre) kifejezhető.

Elemzett mutatók:

  • IgM - az immunoglobulinok ezen osztálya jelenléte a szervezetben fellépő akut fertőző folyamatra utal. Az IgM hiánya egyaránt utalhat egy adott kórokozó hiányára a testben, és a fertőzés krónikus stádiumba történő átmenetére.
  • A negatív IgM teszttel rendelkező IgA leggyakrabban krónikus vagy látens fertőzést jelez. IgM és IgA (közös jelenlét) - két pozitív eredmény jelzi a betegség akut fázisának magasságát.
  • Az IgG vagy a betegség krónikus jellegéről, vagy a fertőző ágensekkel szembeni immunitás kialakulásáról és gyógyulásáról szól.

Lehetséges ELISA eredmények

Mi az ELISA elemzés?
Mi az ELISA elemzés?

Az elemzés tartalmától függően az űrlap táblázatos formában szolgáltathat adatokat, amely felsorolja az összes antitestet vagy antigént, a negatív vagy pozitív reakció megjegyzéseivel, vagy az eredmény mennyiségi értékét (negatív, gyengén pozitív, pozitív vagy élesen pozitív) meg kell jelölni. Ez utóbbi opció határozza meg, hogy hány antitestet tartalmaz az elemzett minta. Egy másik kvantitatív mutató az antitest avidity index, százalékban kifejezve.

Ez jelzi, hogy mennyi idő telt el a fertőző folyamat kezdete óta (minél magasabb az index, annál több).

Manapság több ezer típusú ELISA tesztrendszert állítanak elő, amelyek lehetővé teszik a specifikus antitestek és antigének kimutatását patológiák széles skálájában.

Ezért ezt az elemzést szinte minden orvosi iparban alkalmazzák. Az ELISA segítségével végzett diagnózis garantálja a megfelelő terápia és a betegség hatékony kezelésének megjelölését.

Végül

Időnként, miután a teszt eredményekben kimutatták az IgG antitesteket, például toxoplazmózist vagy herpest, a betegek pánikba kerültek, nem látva, hogy az aktuális fertőzés jelenlétét jelző IgM antitestek egyáltalán nem lehetnek jelen. Ebben az esetben az elemzés egy korábbi fertőzésről szól, amelyre immunitás alakult ki.

Mindenesetre jobb az analízis eredményeinek értelmezését az orvosnak bízni, és szükség esetén vele meghatározni a kezelési taktikát.

Tudjon meg többet:

  • Csoportos elemzés: mi ez, felkészülés és magatartás
  • A széklet kiürülésének vizsgálata: hogyan kell szedni, fogalmak és módszerek
  • A toxoplazmózis elemzése: miért és hogyan kell ezt helyesen alkalmazni

Ajánlott: