ELISA - Enzimhez Kapcsolt Immunszorbens Vizsgálat: átirat

A diagnosztikai módszer (ELISA) informatív és nem túl drága, ezért sok laboratórium ajánlja ügyfeleinek ezt a módszert (enzimhez kapcsolt immunszorbens vizsgálat). A vizsgálatot üres gyomoron végzik, elemzésre vért vesznek a páciens hólyagos vénájából. Az ELISA előtt nem tanácsos dohányozni vagy alkoholt fogyasztani.

A cikk tartalma:

• 1 Mi az ELISA vérvizsgálat?
• 2 Mi az immunglobulin?
• 3 Hogyan történik a vér ELISA vizsgálata
• 4 Immunvizsgálat paraziták ellen ELISA-val
• 5 Hogyan kell használni az ELISA-t?
• 6 ELISA módszerrel végzett immunológiai vérvizsgálat
• 7 A vér ELISA-val végzett immunológiai elemzésének köre
• 8 A felhasználási javallatok és az ELISA-val kimutatott betegségek
• 9 Az ELISA módszer előnyei
• 10 Az ELISA módszer hátrányai
• 11 Lehetséges ELISA eredmények

Mi az ELISA vérvizsgálat?

A véranalízis módszerei között, amelyek lehetővé teszik a test ellenálló képességének a fertőző betegségekkel szemben, és megmutatják a betegség fázisát, az enzim-kapcsolt immunszorbens vizsgálat (ELISA) fontos helyet foglal el. Ez a tanulmány lehetővé teszi a vér védő funkciójának aktivitásának átfogó felmérését és az immunhiány állapotának azonosítását fertőző kóros betegségek, valamint vérbetegségek, autoimmun folyamatok, hormonális problémák esetén.

Ez egy laboratóriumi vizsgálat, amely lehetővé teszi, hogy meghatározhassa bizonyos antigének (patogén ágensek) specifikus ellenanyagai (fehérje jellegű vér védő tényezői) jelenlétét. Az antitestek között az immunoglobulinok, amelyek immunkomplexek formájában létezhetnek, kiemelkedően fontosak.

Az immunoglobulinok az emberi immunitás komplex neurohumoral reakcióinak eredményeként képződnek, amelyek idegen antigének bejuttatásának eredményeként alakulnak ki. Az egyes kórokozó-kórokozók típusaihoz saját specifikus ellenanyagokat állítanak elő. Egy antigént vagy patológiás mikroorganizmust "megkötve" működnek, és komplex "antigén-antitest" vegyületet képeznek, majd ezt követő semlegesítéssel, enzimes lízissel, fagocitózis-reakciókkal és a testből való kivonással. Bizonyos komplexek jelenléte határozza meg az ELISA módszer a kórokozó típusát vagy a betegben jelen lévő káros anyagot.

Az alacsony ár és a vér biológiai anyagként való felhasználása miatt ezt a módszert szűrési módszerként használják. Például, ha parazitózis gyanúja merül fel, a betegek vért adnak a kerekférgek, lamblia stb. Ellenanyagok meghatározására. Ha az eredmény pozitív, akkor nem szabad azonnal elkezdenie a paraziták kezelését - össze kell hasonlítani a klinikai képet, az ELISA és esetleg más vizsgálati módszerek eredményeit.

Érdemes megjegyezni, hogy az elvégzett kezelés után az antitestek nagyon hosszú ideig maradhatnak a testünkben, még akkor is, ha a fertőzés elhagyta a testünket, azaz az úgynevezett "szerológiai heg" megmarad. Például csillagok ezrei vannak az éjszakai égbolton. E csillagok közül sok már régen meghalt, de fényük eddig, évszázadok óta ragyogott. Valójában csak egy csillagútot látunk. Világosság van, de a csillag már régen eltűnt.

De ha nincs fény, ez nem azt jelenti, hogy a csillag nem volt ott. Ugyanez vonatkozik az antitestekre. Jelenléte nem garantálja a kívánt fertőző kórokozó jelenlétét a testben. Antitestek hiánya nem azt jelenti, hogy nincs fertőzés. Ha az ELISA-elemzés eredménye pozitív, akkor ez azt jelenti, hogy a fertőzést konkrétabb és drágább módszerekkel kell keresni - PCR, bakteriológiai tenyészetek. Hamis pozitív eredmény akkor lehetséges, ha több mikrobának hasonló antigén szerkezete van, akkor „hasonló” ellenanyagokat állítanak elő a különböző mikrobák számára.

Mik az immunoglobulinok?

Az immunoglobulinok öt fő osztályát felfedezték és tanulmányozták - IgA, IgM, IgG, IgD, IgE. a többi szerepét még nem sikerült tisztázni, és a tudományos kutatás szakaszában van.

Az A immunglobulin (IgA) fő feladata a légzőrendszer, a gyomor-bél traktus és a húgyúti rendszer nyálkahártyáinak védő funkciói. A betegség akut kialakulásával lehetetlen azonosítani őket. Ezek a védőkomplexek csak a betegség kezdete után 2 héttel, néha később jelentkeznek. Az A immunglobulin nagy része a nyálkahártyákban koncentrálódik. Körülbelül 80%. Az antitestek többi része a vérben kering.

A fő funkció a mikroorganizmusok semlegesítése és megsemmisítése. A betegség akut megnyilvánulásainak enyhülése után ezen immunoglobulinok mennyisége csökkenni kezd, és a betegség kezdete után legfeljebb 8 hétig teljesen eltűnik. Ha egy IgA-t később észlelnek, akkor ez jelzi a folyamat kronizálását.

A fejlődő patológia akut fázisának fő és első markerei az M osztályú immunglobulinok (IgM). A rossz közérzet kezdete 5. napján találják meg őket. A vérben való jelenlétük körülbelül 6 hétig meghatározható. Aztán gyorsan eltűnnek.

A reziduális immunválaszt a G osztályú immunglobulinok (IgG) jelenléte jellemzi a vérben. Ezeknek a tényezőknek a megjelenése a vérben kb. Egy hónappal a betegség kezdete után észlelhető. A jövőben számos hónapra, évre, sőt egész életre meghatározhatók, védő funkciót hajtva végre a betegség visszatérése (visszaesése) ellen, és bizonyos esetekben lehetetlenné téve a patológia másodlagos fejlődését.

Ha a G immunglobulin mennyisége ismét emelkedni kezd, akkor feltételezhető az újrafertőzés. Hasonló következtetést lehet levonni két vagy három, 2 hetes intervallumban elvégzett vizsgálat elvégzésével.

Az immunoglobulint E (IgE) a parasitológia gyakorlatában használják, míg az immunoglobulin D (IgD) a B-limfocitákon helyezkedik el, egészséges emberekben alacsony koncentrációban található meg. 10 éves élet után eléri a maximális értékeket. A D immunoglobulin mennyisége növekszik terhesség alatt, szisztémás kötőszöveti betegségben, hörgő asztmában és immunhiányos állapot által okozott betegekben.

Hogyan történik a vér ELISA vizsgálata?

Az enzim immunológiai vizsgálatához a legtöbb esetben a beteg vérét használják, néha az üveges test szövetét, a gerinccsatorna folyadékát és az amniotikus folyadékot veszik.

A vért az injekciós tűn keresztül a fecskendőbe veszik a koponyavénából. A vizsgálatot üres gyomoron végezzük. Ne feledje, hogy bizonyos gyógyszerek szedése befolyásolhatja a teszt eredményét. Véradás előtt tartózkodjon a dohányzástól és az alkoholfogyasztástól. A kábítószer bevétele torzíthatja az eredményeket.

Az IgM, IgG, IgA immunoglobulinok negatív értékei esetén a betegség hiányáról vagy annak kezdeti fázisáról beszélhetünk, és a mínuszokkal járó eredmény jelentős idő elteltével történő teljes gyógyulással lehetséges.

Ha az IgA-t és az IgM-et nem észlelik, és az IgG pozitív módon manifesztálódik, akkor valószínűleg a fertőző betegség vagy oltás után kialakult immunitásról beszélünk.

Ha az IgA-t és az IgM-et nem észlelik, és az IgG pozitív módon manifesztálódik, akkor minden valószínűség szerint a fertőző betegség vagy oltás után kialakult immunitásról beszélünk

Az IgM magas titerének és az IgG, IgA negatív értékének esetében arra lehet következtetni, hogy van egy akut fertőző betegség.

Az immunglobulinok - IgA, IgM, IgG - eredményeinek egyidejű pozitív értékei jellemzik a meglévő krónikus betegség megismétlődésének akut szakaszát.

A krónikus fertőzés esetén a folyamat elmúlásának (remisszió) fázisában az ELISA negatív értékeket mutat az immunoglobulin M (IgM) -ért, míg az immunoglobulin G (IgG) és A (IgA) eredménye pozitív lesz.

Paraziták immunvizsgálata ELISA-val

Az ELISA a paraziták enzimhez kapcsolt immunszorbens vizsgálatának rövidítése. Ez magában foglalja az ember immunrendszerének orvosi vizsgálatát. A teszt az antitestek azon képességén alapszik, hogy megváltoztassa színét. Ennek a diagnosztikai módszernek számos pozitív tulajdonsága van. Például képes felfedezni a fertőzés által okozott betegségek hatalmas változatát. A leghatékonyabb parazita szervezetek által okozott betegségek esetén.

Amit a bemutatott technológia ad: a helminták vérben való jelenlétének meghatározása; más kórokozók keresése a testben; megtudhatja az egészség romlásának okait; a kezelés az így kapott analíziseken is alapul; figyelemmel kísérheti immunrendszere egészségét.

Egy másik jó tulajdonság a rákmarkerek nyomon követésének képessége, származástól függetlenül, természetesen a testben való jelenlétüktől függően. Ez a teszt az emberi reproduktív rendszer állapotának leírására is alkalmas. Bizonyos fehérjék, hormonok és peptidek lehetővé teszik a partner megfogalmazását a gyermek fogantatásának szempontjából, valamint a jövőbeni magzat feltételezett minőségét.

A vérvizsgálat a Giardia számára meglehetősen népszerű gyakorlat a modern orvosok körében. Ezenkívül ez a kutatási módszer kiváló eszköz az orvosbiológiai elemzéshez és a kvantitatív statisztikákhoz a specifikus antigének szempontjából.

Hogyan használják az ELISA módszert?

Nagy hiba lenne összekeverni az ELISA-módszert a szondázási módszerrel és az azt követő székletméréssel. Az utóbbiakat mikroszkopikus szintű módszerekkel hajtják végre, amikor egy beteg által adott székletmintát vesznek, vagy egy potenciális betegtől közvetlenül egy orvosi intézményben veszik. A mintában megkísérlik felfedezni a helmintos inváziókat és más komponenseket, úgy vagy úgy, a paraziták életképességével összefüggésben. Nem csak a mikroszkópos parazita organizmusokat vizsgálják, hanem maradványaikat, tojásaikat és lárváikat is.

Az ELISA értelmezése nem biztos, hogy teljes mértékben megérti a problémát, ezért tanácsos orvoshoz vagy laboratóriumi asszisztenshez fordulni. Hiba azt gondolni, hogy ez a módszer csak akkor releváns, ha a helminták parazitizálnak a bélben. Számos más szervet is diagnosztizáltak - a paraziták élhetnek a duodenumban, az epevezetékben, a májban és még a hasnyálmirigyben is.

Igaz, hogy ezek összetettebb esetek, tehát egy ilyen elemzés minősége nagyban függ a tesztet végző laboratóriumi dolgozóktól. A technológia jellemzői és különbsége a régi laboratóriumi kutatásokhoz képest:

• most a székletminta helyett vért használnak a helminták jelenlétének meghatározására;
• a mintát nagyon gyorsan megvizsgálják a laboratóriumban, másnap teljes információt kaphatnak;
• a laboratóriumi kutatás költsége olcsó, mivel a teológia nagyon egyszerű;
• a helminták vérvizsgálata nagy pontosságot ad.

A vizsgálati eredmények relevanciája és hitelessége közvetlenül arányos az orvosi személyzet képesítésével, a laboratóriumi műszaki felszereléssel, valamint az orvosok gondatlanságának vagy figyelmetlenségének hiányával. Még a legfigyelemreméltóbb és felelősségteljesebb laboratóriumi asszisztens is hatalmas nehézségeket tapasztal, ha a parazita a testben jelen van a minimális populációjában, vagy ha a tengelykapcsolót a vizsgálat idején azonnal elvégezték.

Vér immunológiai elemzése ELISA-val

Kevés ember tudja, hogy mi a vérvizsgálat az emberi immunológiai rendszer szempontjából, mivel ezek a vizsgálatok nem olyan gyakoriak. Általános szabály, hogy egy ilyen vérvizsgálat információt nyújt az immunhiány vírusról az emberi testben, és névtelen, mivel a beteg kérésére elvégzik.

Alapvetően az ELISA elemzéshez a vizsgált biológiai anyag vér, azonban cerebrospinális folyadék, az üveges test tartalma, amniotikus folyadék stb. Megvizsgálhatók.

A mintavételhez az üres gyomor vénájából vett vért kell felhasználni, amelyből a szérumot centrifugálással kutatás céljából nyerik. Ezenkívül a vérszérum vizsgálata számos nemi úton terjedő betegséget (szifilisz, herpesz, chlamydia), valamint a hepatitis, kanyaró, rubeola, mumpsz és toxoplazmózis valamennyi típusát fedezheti fel.

Alapvetően az ELISA elemzéshez a vizsgált biológiai anyag vér, azonban cerebrospinális folyadék, az üveges test tartalma, amniotikus folyadék stb. Megvizsgálhatók.

Az immunoglobulinok olyan immunmolekulák, amelyek a test legtöbb fertőző kórokozójához és toxinjához köthetnek és semlegesítik azokat. Ebben az esetben az immunglobulinok legfontosabb jellemzője specifikusságuk, vagyis egy adott antigénhez való kötődés képessége. Ez az tulajdonság az immunoglobulin vérvizsgálatának elvégzéséhez.

Az immunglobulinok öt típusa létezik, de a leginkább tanulmányozott A, M és G. immunglobulinok. Az M és G immunoglobulinok a vérben aktívak. Az A immunglobulinok egyfajta gát a nyálkahártyák felületén, mivel ezek nagy mennyiségben vannak jelen.

Az immunológiai vérvizsgálat lehetővé teszi az immunoglobulinok típusának meghatározását, ennek köszönhetően az ELISA lehetővé teszi nemcsak a betegség diagnosztizálását, hanem annak stádiumának meghatározását és a betegség dinamikájának nyomon követését is:

• a betegség első 2 hetében csak az A immunglobulin található;
• a betegség 2. és 3. hetében az A és M immunglobulinok találhatók a vérben;
• CC3 4 hétig, az immunoglobulin vérvizsgálatát mindhárom típus határozza meg;
• a gyógyulás során az M immunglobulinok eltűnnek a vérben, és A és G mennyisége 2-4-szer csökken;
• krónikus folyamat jelenlétében a G immunglobulinok szükségszerűen jelen vannak a vérben, M immunglobulinok hiányoznak, A immunglobulinok jelen lehetnek vagy hiányozhatnak.

Az immunológiai vérvizsgálat hatálya ELISA-val

• A vírusos betegségek diagnosztikája: hepatitis, herpes, Epstein-Barr vírus, citomegalovírus stb.
• szexuális úton terjedő fertőzések: chlamydia, gonorrhea, Trichomonas, mycoplasma, ureaplasma;
• szifilisz; endokrinológia (hormonszint meghatározása);
• tumorsejtek (onkológiai betegségek diagnosztizálása); immunológia (immunhiány diagnosztizálása);
• allergia (az allergia diagnosztizálása és kezelése).

A szerológiai vérvizsgálat laboratóriumi vérvizsgálati módszer, amelyet a fertőző betegségek diagnosztizálására és a fertőző folyamat stádiumának meghatározására használnak. A szerológiai válasz az antitestek és az antigének kölcsönhatásán alapul.

Az antigének meghatározása szolgál a mikroorganizmusok nemzetségének és fajainak meghatározására. Ezt a kutatási módszert használják az urológiában és a venereológiában. A szerológiai vérvizsgálathoz vért kell venni reggel egy üres gyomorból egy vénából.

A kinevezés indikációi és a kimutatott betegségek ELISA módszerrel

Az ELISA fő biológiai anyaga a vérszérum: a laboratóriumban vénát vesznek a betegből egy vénából, ahonnan az elemzést bonyolító alakú elemek eltávolíthatók. Más esetekben cerebrospinális folyadékot, amniotikus folyadékot, nyálkahártyák kenetét stb. Használják az elemzéshez.

Az eredmények torzulásának elkerülése érdekében ajánlott vért adni éhgyomorra, és két héttel a vizsgálat előtt (ha a cél a krónikus, látens fertőző betegségek diagnosztizálása) meg kell szüntetni az antibiotikumok és az antivirális gyógyszerek szedését. Lehetetlen lefedni az ELISA indikációinak teljes listáját.

Az elemzés leggyakoribb céljai:

• akut és krónikus fertőző betegségek diagnosztizálása: IgM és IgG vírusos hepatitis A, B, C, E, valamint hepatitis B és C antigének ellen; IgG-től HIV-ig; Ig M és IgG a citomegalovírus fertőzéshez; IgM és IgG az Epstein-Barr vírushoz; Ig M és IgG herpeszfertőzésekhez; Ig M és IgG toxoplasmosis;
• Ig M és IgG a kanyaró, a rubeola, a szalmonellózis, a dizentéria, a kullancsos encephalitis és más betegségek esetében; IgG parazita betegségekhez; Ig M és IgG szexuális úton terjedő fertőzésekhez; IgG Helicobacter pylori fertőzéshez. Az emberi immunitás indikátorainak és egyes autoimmun betegségek markereinek általános értékelése. Onkológiai markerek (tumor nekrózis faktor, prosztataspecifikus antigén, rák-embrionális antigén és mások) azonosítása. Hormontartalom meghatározása a vérszérumban (progeszteron, prolaktin, tesztoszteron, pajzsmirigy stimuláló hormon és mások).

Az ELISA módszer előnyei

Az ELISA vitathatatlan előnyei a módszer nagy érzékenysége és specifitása. Az érzékenység az a képesség, hogy felismerje a célanyagot, akkor is, ha annak koncentrációja a mintában alacsony. A specifitás viszont a diagnózis pontosságát vonja maga után: ha az eredmény pozitív, ez azt jelenti, hogy pontosan azt a antitestet vagy antigént találták, amelyre feltételezték, és nem másoknak.

Az ELISA nagymértékben felváltotta a mikrobiológia "aranystandardját" - egy bakteriológiai diagnosztikai módszert, amelynek során a kórokozó azonosítása érdekében elválasztották a testből, majd a tenyészetet táptalajon tenyésztő csőben tenyésztették néhány napig.

Az elemzés folyamán az orvosok egész ideje kénytelenek voltak vakon kezelni a beteget, és a mikroorganizmus eredetére sejtették a betegség tüneteitől. Az IgM ELISA-val történő meghatározása lehetővé teszi a pontos diagnosztizálást a betegség első napjaiban.

Az enzim immunoassay nagyfokú gyárthatósága minimalizálja az emberi faktor befolyását, ami csökkenti a hiba valószínűségét. A modern laboratóriumokban használt ELISA tesztkészletek és reagensek többségét ipari környezetben gyártják, ami garantálja a pontos eredményt.

Az ELISA módszer hátrányai

Sajnos az ELISA elvégzéséhez tudnia kell, hogy mit kell keresnie: az elemzési módszer azt jelenti, hogy az orvosnak előre becslése van a betegség természetéről. Ezért nincs értelme előírni egy ilyen tesztet abban a reményben, hogy véletlenül "kitalálhatja" a diagnózist.

A fertőző betegségek diagnosztizálása esetén az enzim immunológiai vizsgálata nem képes megtalálni a kórokozót és meghatározni annak specifikus tulajdonságait: ez csak antitestek jelenlétét jelzi a páciens vérében, közvetetten jelzi az idegen mikroorganizmusok jelenlétét az emberi testben. Az ELISA rendkívül pontos, de nem olcsó módszer, ezért okosan kell használnia, és az eredményeket képzett orvosnak kell értelmeznie.

Lehetséges ELISA eredmények

Az elemzés tartalmától függően az űrlap táblázatos formában szolgáltathat adatokat, amely felsorolja az összes antitestet vagy antigént, a negatív vagy pozitív reakció megjegyzéseivel, vagy az eredmény mennyiségi értékét (negatív, gyengén pozitív, pozitív vagy élesen pozitív) meg kell jelölni.

Ez utóbbi opció határozza meg, hogy hány antitestet tartalmaz az elemzett minta. Egy másik kvantitatív mutató az antitest avidity index, százalékban kifejezve. Ez jelzi, hogy mennyi idő telt el a fertőző folyamat kezdete óta (minél magasabb az index, annál több).

Manapság több ezer típusú ELISA tesztrendszert állítanak elő, amelyek lehetővé teszik a specifikus antitestek és antigének kimutatását patológiák széles skálájában. Ezért ezt az elemzést szinte minden orvosi iparban alkalmazzák. Az ELISA segítségével végzett diagnózis garantálja a megfelelő terápia és a betegség hatékony kezelésének megjelölését.

Ha rendelkeznek a szükséges reagensekkel és a laboratórium megfelelő szervezésével, a teszt eredményét a vérvétel után 1–2 napon belül megkapják. Egyes esetekben, ha sürgősségi reagálásra van szükség, ez az időtartam 2-3 órára csökkenthető.

A jó minőségű ELISA eredménye egyértelmű ítélet lesz: a kívánt anyag vagy megtalálható, vagy nem található meg a mintában. Ha kvantitatív elemzésről beszélünk, akkor a koncentráció numerikus értékben vagy bizonyos számú "+" jel (egyről többre) kifejezhető.

Tudjon meg többet:

• Antitest vérvizsgálat: az immunrendszer diagnosztizálása
• Immunassay vérvizsgálat a parazitológiában